详解sCMOS相机高速成像性能在生物

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扶助操纵者马上搜求样本和调治焦距

高速成像所带来的第一个长处即是搜求样本越发便利。在相机的成像速率还很慢慢的“旧CCD期间”,为了马上调治焦平面场所和搜求适宜拍照的样本,测验人员必需直接在目镜下实行视察。关于明场成像来讲这并不窘迫,然而一些荧光记号或者弱到在目镜下没法直接视察,这就给测验人员带来了操纵上的不便。

Flash4.0的高灵活度使得在弱荧光下相机仍旧能用低暴光工夫对样本实行成像,测验人员也许在显示屏上直接视察镜下样本,无“推迟”地调治载物台场所和图象焦距,在正当的情形下大幅度升高唆使的荧光功率,使光毒性降到最低。

这类个性使其在一些非常运用中表现着奇特的影响。比如膜片钳这类须要尽或者防止机器振动的运用,高速相机使得在显示屏上及时用玻璃电极对神经元实行显微操纵成为或者(以防止肉眼在目镜下视察所带来的振动)。

运用前提:无推迟的及时显示须要30fps以上的相机

产物型号保举:Flash4.0LT+/Flash4.0L

捕获高速疏通的生物样本

一些生物样本在视察的流程中会产生马上的位移变动,偶尔须要对这些马上位移的样本实行细节上的纪录,这时相本也许到达的帧速越快,对这些位移细节的描述就越明显。

小鼠心肌细胞搏动高速成像帧/秒原速

运用前提:明场高速成像只要要高速的sCMOS相机,心脏相干的成像速率通常在fps以上。

产物型号保举:Flash4.0LT+/Flash4.0LT

斑马鱼血管高速荧光成像帧/秒减慢20倍

运用前提:荧光高速成像须要高灵活和高速同时完备的sCMOS相机,马上活动的荧光标识物的视察须要fps以上,且相机QE需80%以上。

产物型号保举:Flash4.0V3

捕获荧光记号的马上变动

许多生理生化流程伴有着荧光记号的马上变动。关于这些马上变动的记号,偶尔单凭肉眼都没法分辩,此时经由Flash4.0的高速成像却也许很好的捕获到这些音信。

神经元膜电位的超高速荧光成像

在上图中,肉眼是看不到神经元胞体因膜电位变动而造成的荧光记号变动的;然而在高速成像下经由对图片灰度的工夫解析,就可以看到1ms工夫标准内荧光的马上变动了。

其它一些肉眼也许视察到的变动,通太高速成像则也许更好的探索其记号随工夫的变动流程。比如钙离子荧光染料或荧光卵白(Fluo-4、GCaMP等),其荧光强度会随钙离子浓度的抬高而抬高。

心肌细胞钙离子浓度随工夫的变动帧/秒减慢10倍

运用前提:荧光高速成像须要高灵活和高速同时完备的sCMOS相机,钙波与钙火花的视察须要fps以上,且相机QE需80%以上。

产物型号保举:Flash4.0V3/Flash4.0LT+

记号转导与下游效应纪录

Flash4.0的高速还也许在毫秒级别下列纪录到生物记号的转导与细胞造成的下游效应。

比如不才面的例子中,对细胞钙离子记号和细胞紧缩舒张的明场出入实行同步成像后,定量解析图象的灰度变动也许获得两个变乱的工夫音信。对比两个工夫弧线咱们也许看到,钙离子记号先产生变动,以后细胞才产生紧缩形变,两者之间的工夫差即为钙离子记号转导工夫。

iPS开辟分裂的类心肌细胞搏动与钙记号变动

运用前提:荧光高速成像合营明场实行同步成像,须要高灵活和高速同时完备的sCMOS相机,并搭配双色分光器组件,机须要fps以上,相机QE需80%以上。

产物型号保举:Flash4.0V3/Flash4.0LT++W-ViewGemini

合营高端成像办法的运用

仓卒进展的显微成像技巧正对光探测器的本能不停提议新的请求。在对厚样本的深度成像或是对亚细胞组织的超分辩成像中,Flash4.0相机都以其出色的本能在成像探测器范围占领一席之地。

1

Light-sheet光片照明因其可与激光共聚焦相媲美的Z轴分辩率和比激光共聚焦更快的成像速率在一些形式动物器官和胚胎的活体成像中的具备显著上风。Flash4.0相机的高帧速成像本领合营片状光的扫描也许实行仓卒对厚样本实行Z-stack扫描成像,偏重修其3D组织。这类办法非常合适拍照机关器官高速变动的情形(如心脏跳动)。

2

SpinningDisk共聚焦做为一种很老练的共聚焦成像办法,也许供给点扫描共聚焦没法比较的高速成像本领。这一高速成像本领除了要归功于Nipkow转盘带来的多针孔外,还须要sCMOS的高速拍照本能相合营,进而在video-rate下获得与点扫描共聚焦相当的高分辩图片。

3

超分辩成像技巧近几年博得的极大冲破使得人类打垮看来光的衍射极限,将看来光波段的细胞亚显微组织分辩率升高到了与电镜相当的程度。

在种种超分辩技巧中,Flash4.0的高速和高分辩率芯片很适适用于一大类称为SMSN(Single-MolecularSwitchingNanoscopy)的超分辩成像中(包含咱们熟知的STROM和PALM)。通太短工夫内的随机单分子荧光开-关,终究在毫秒级的工夫标准下造成一副超分辩图象。而恰是Flash4.0的高速和高灵活度,能使得测验者操纵更高的频次来随机唆使单分子荧光开关,进而缩小一切系统的成像工夫。

附:Flash4.0相机的帧速与ROI巨细的相干

(点开涉猎大图)

好了~Flash4.0相机君的解说就到这边了,由于视频束缚起源,部份转为图片的文献在速率和明显度上有变动,想看原视频的小同伙,也许点击文末“涉猎原文”~

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