斑马鱼行为实验专题10丨斑马鱼慢性不可预
目前,慢性不可预测应激(CUS)是应用于啮齿动物的一种主要抑郁症实验模型,有效模拟了人类焦虑、抑郁及其他情绪障碍病患者所展现的多种行为表现。研究发现,慢性压力的初期反应通常为焦虑,随后可能发展为抑郁症,而这些心理疾病又是其他身体健康问题(比如炎症性肠病)的明显风险因素。因此,为了更好地研究慢性压力对大脑的影响以及确定潜在的中枢神经系统(CNS)药物筛选方法,迫切需要开发出更为简便的模型。慢性不可预测应激模型通过对啮齿动物施加一系列持续的压力因素,如限制活动、拥挤、隔离、温度变化、光线变化、噪音干扰和/或捕食者威胁等,成为了研究抑郁症的一个广泛使用的方法。除了啮齿动物之外,斑马鱼作为一种模型生物,也开始被广泛应用于评估情感障碍(如焦虑和抑郁等)的病理生物学机制研究中。
在实验中,我们通过实施一系列应激条件,如禁食、强制迁移、过度拥挤和社会孤立,来建立抑郁症状的斑马鱼模型。这些应激源的选取旨在模拟导致抑郁的环境因素。随后,我们将通过行为测试和检测单胺类神经递质的变化,来评估所建立模型的有效性和适用性。此外,在连续不断的慢性不可预测的轻微应激(CUS)条件下,我们预期实验中的动物将展示出神经内分泌系统的显著变化。
应激试验过程
1、禁食24h2、黑暗环境处理24h3、红桶拥挤应激8h,转移回水箱
4、暴露于攻击性鱼(2条成年蓝曼龙)24h
5、明暗应激处理12h→30%浅水应激12h
6、社交隔离8h→禁食24h
7、0.5L三色杯拥挤应激6h
8、红桶应激,同时强光照射,加入10L攻击性鱼的养殖水
9、20%浅水应激加黑暗处理24h
10、红桶应激,加入30mL从斑马鱼体表刮取的警示信息素暴露8h
11、置于1.5L新型水箱中进行密集拥挤环境应激6h→加入10%攻击鱼养殖水
12、明暗应激处理8h→60%浅水应激+强光照射2h
13、鱼网追逐20min,黑暗处理24h
14、暴露于攻击性鱼24h
15、更换60%水→三色杯应激8h→添加10%同类鱼养殖水
16、添加40mL警示信息素,在22℃水中于强光灯照射下,摇床(60rpm)震荡6h
17、社交隔离8h→黑暗处理16h
18、30%浅水暴露8h,添加捕食者养殖水10L
19、明暗箱应激5min→暴露于空气中1min,重复3次→两条蓝曼龙处理24h
20、黑暗与禁食24h
21、三色杯且强光照射6h→50%浅水暴露6h
22、社交隔离8h→鱼网驱逐15min→添加10%捕食者养殖水
23、空气暴露→1条蓝曼龙应激5h→加入警示信息素
24、更换50%水,禁食24h
25、黑暗处理24h
26、30%浅水和强光照射2h→红桶应激6h
27、暴露于2条成年蓝曼龙24h
28、强光照射加拥挤应激→警示信息素暴露6h
29、禁食24h
30、鱼网追逐15min→5L小水箱拥挤且强光应激20min→冰块局部低温应激→30%浅水应激24h
31、三色杯应激8h→添加10%捕食者养殖水
32、明暗箱(15条/L)应激8h→60%浅水暴露16L
33、红桶应激8h
34、黑暗且禁食处理24h
35、拥挤(30条/L)加强光应激8h→暴露于红色斑马鱼14h
实验流程简图参考文献
FonsekaTM,WenXY,FosterJA,etal.Zebrafishmodelsofmajordepressivedisorders[J].JNeurosciRes,,94(1):3-14.
胡国俊.丙戊酸钠对慢性不可预知应激诱导斑马鱼抑郁模型的改善作用及机制研究[D].西南大学,.DOI:10./d.cnki.gxndx...
OwensMJ,NemeroffCB.Roleofserotonininthepathophysiologyofdepression:focusontheserotonintransporter[J].ClinChem,,40(2):-.
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