它不是抗体,它是活体细胞成像新工具
最行之有用的一种技巧名叫抗原表位符号(epitopetagging),抗原表位与宗旨卵白合并,再运用荧光符号抗体使卵白质看来。但是,这类技巧只可窥察安定的死细胞。
几十年来,科学家们高明地应用免疫系统追踪侵犯病原体的自然抗体和其筛选性符号机制来打算基于抗体的各样探针,探索细胞内不同表率的卵白质。最行之有用的一种技巧名叫抗原表位符号(epitopetagging),抗原表位与宗旨卵白合并,再运用荧光符号抗体使卵白质看来。但是,这类技巧只可窥察安定的死细胞。
此刻,科罗拉多州立大学和东京理工学院的跨学科团队为抗原探针库制做了一个新器械——可用于活细胞的基因编码探针。探索成就发布在7月3日的《NatureCommunications》。
Stasevich实习室的博后学者NingZhao是这项技巧的首要首创人,他们打算的新式抗体探针被密切地称为“弗兰肯体(Frankenbody)”,由于它就像闻名小说《弗兰肯斯坦》中刻画的科学怪人。科学家们索取了寻常抗体的连合区,即“粘性部份”,尔后再将它们移植到不同支架上,进而在活细胞中坚持安定且保存抗体奇异性。
“你直接能够把它当做活细胞成像试剂,”生物化学和分子生物学系协理教导Stasevich说。“不需求绿色荧光卵白这些标签,它自己便是一种能与你的宗旨卵白连合的荧光抗体。”
身披诺奖名誉的绿色荧光卵白是一种被普遍运用的生化器械。但是,GFP尺寸相对较大,发光光阴也遭到必定的束缚。新探针体积变小了,发光速率变快了,因而能够时刻拿获宗旨卵白的生成。
探索人员运用典范的HA标签测试了新器械。HA是一种袖珍线性表位符号,根源于人流感病毒卵白凝血素的构成部份。“很永劫间以来,咱们不断在安定的、升天的细胞中窥察HA符号卵白,”Stasevich说。“此刻咱们看到了这些卵白在活细胞中的动态。”
将来他们还打算操纵新探针来开展新式RNA成像实习。保守的抗体价钱不菲(每每一个定单需消费数百美元),况且存在许多变异性,很难加入细胞。因而,Stasevich以为他们的新探针为卵白质和RNA翻译成像供给了一种低成本的处置打算。
在本文中,科学家曾经展现了一些应用,包罗单卵白追踪、单RNA翻译成像和斑马鱼胚胎的强调荧光成像。通盘这些实习对保守的荧光卵白标签都很有挑战性。
参考文件:
AgeneticallyencodedprobeforimagingnascentandmatureHA-taggedproteinsinvivo
生物通编纂
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